حمیدرضا علیزاده

لیموترش یکی از محصولات مهم و اقتصادی استان‏های جنوبی کشور و سایر استان‏های حاشیه خلیج‏فارس می‏باشد. که با بیمارگر "Phytoplasma aurantifolia Candidatus" به عنوان جدی‏ترین تهدید، با خطر نابودی مواجه است. پیشرفت این بیماری موجب نابودی کامل این محصول و سایر گیاهان حساس و بالطبع خسارت جبران ناپذیر بر اقتصاد، اشتغال و صنعت لیموترش خواهد شد. به دلیل محدود بودن عامل بیماری به آوندآبکش، روش‏های مبارزه تا کنون فقط جنبه پیشنهادی داشته و فاقد اثر درمانی بر روند این بیماری بوده است. با توجه به استراتژی جدید اندوفیت‏ها، به عنوان بهترین و موثرترین مولفه‏های کنترل بیولوژیک از طریق تعاملات با یکدیگر و گیاهان میزبان به واسطه تولید بیوفیلم ، متابولیت‏های ثانویه، مواد فرار، آنتی‏بیوتیک‏ها من‏جمله سورفکتین می‏توانند در کنترل فیتوپلاسماها حائز اهمیت باشند. در این تحقیق به منظور شناسایی تعداد و تنوع باکتری‏های اندوفیت موجود در درختان سالم و آلوده به بیماری جاروک و بررسی تغییرات در دو فصل تابستان و زمستان نمونه برداری از سه درخت سالم و سه درخت آلوده به جاروک لیموترش انجام شد. نمونه‏های ریشه، ساقه و برگ پس از آبشویی به ترتیب در اتانول 70 درصد، هیپوکلریت دو درصد تجاری و مجدد در اتانول 70 درصد ضدعفونی گردید. پس از پنج مرتبه آبشویی، از نمونه‏های خرد شده گیاهی‏، پس از نیم ساعت کشت تهیه شد. به مدت هفت روز تعداد و تنوع باکتری‏ها یادداشت گردید. پس از انجام آزمون‏های بیوشیمیایی (گرم، کاتالاز، اکسیداز و لوان) گروهبندی برای 754 باکتری استخراج شده دو نمونه برداری انجام شد. بر اساس درخت دندروگرام ترسیم شده با نرم افزار SPSS، مجموع درختان سالم در دو فصل در 16 گروه و درختان آلوده دو فصل در 15 گروه قرار گرفتند. پس از انجام استخراج DNA، PCR، توالی یابی و مقایسه توالی‏ ها با اطلاعات موجود در NCBI فراوانی گونه‏های Pseudomonas=25/83، 0/8, Stenotrophomonas maltophitia = 6/63, Bacillus=19/23 = ,Entrobacter Ochrobactrum anthropic=0/8 و Aeromonas=0/66 درصد به دست آمد.گونه های Ochrobactrum anthropic و Entrobacter فقط از درختان سالم و گونه Aeromonas فقط از درختان آلوده جداسازی گردید.