عبدالله رمضانی قرا

سرطان یکی از کشنده ترین عوامل مرگ و میر در دنیا، سالیانه بیش از 5/7 میلیون نفر را به کام مرگ می کشاند. با توجه به این که برخی از ترکیبات گیاهان دارای اثرات ضد توموری از جمله القای مرگ برنامه ریزی شده سلول های سرطانی هستند و عوارض جانبی استفاده از آن ها کم است، در این تحقیق اثرات ضد سرطانی و مرگ برنامه ریزی شده سلولی عصاره مختلف بذر خارسنبل Blepharis persicaبر روی سلول های سرطانی سینه، پروستات، معده، روده و سلول های فیبروبلاست (به عنوان کنترل) بررسی و اثر هم افزایی آن با دارو دوکسوروبیسین مطالعه شد. ابتدا عصاره های آبی، هیدروالکلی، الکلی و ان- هگزانی بذر خارسنبل با استفاده از روش خیساندن، فراصوت و جوشاندن تهیه شد. غلظت های 10، 5/7، 5، 5/2، 25/1، 625/0، 312/0 و 156/0 میلی گرم بر میلی لیتر از عصاره های هیدروالکلی و آبی و غلظت های 10، 5، 5/2، 25/1، 312/0 از عصاره های الکلی و هگزانی و 4 غلظت ترکیبی از دوکسوروبیسین (125و 5/62 نانوگرم بر میلی لیتر) با عصاره غلظت های( 315/0و 625/0 میلی گرم بر میلی لیتر) برای عصاره هیدروالکلی و آبی و 2 غلظت ترکیبی از دوکسوروبیسین (125و 5/62 نانوگرم بر میلی لیتر) با عصاره غلظت ( 315/0میلی گرم بر میلی لیتر) برای عصاره الکلی و هگزانی تهیه شد. سلول های سرطانی سینه (MCF-7)، پروستات -(LNCaP)، روده (HT-29)، سلول های معده (AGS)و سلول های فیبروبلاست (SKM)کشت داده شدند. درصد زنده مانی و مهار رشد سلولی با تست سمیت (MTT) اندازه گیری شد .میزان مرگ برنامه ریزی شده سلولی در رده-های سلولی تحت تیمار عصاره هیدروالکلی از روش فلوسایتومتری با استفاده از Annexin/PI سنجیده شد و ترکیبات فیتوشیمیایی عصاره هیدروالکلی بذر خارسنبل با روش GC-MS مشخص شد و همچنین به منظور تعیین ترکیبات فنولی و فلاونوئیدی در عصاره گیاه از روش سیوکالتیو و رنگ سنجی آلومونیوم کلراید استفاده شد. بررسی بیان ژن BCL2 وBAX در مدت 24و 48 ساعت با استفاده از روشRT-qPCR در سلول های تحت تیمار عصاره هیدروالکلی - خیساندن، عصاره هیدروالکلی - فراصوت، عصاره آبی - خیساندن و عصاره آبی - جوشانده بذر صورت گرفت. عصاره های مختلف بر روی رده های سلول های سرطانی تاثیر گذار بودند. به ترتیب عصاره هیدروالکلی - خیساندن بر روی رده های سلولی پروستات، عصاره آبی – خیساندن بر رده های سلولی روده و در رده سلول های سرطانی سینه